Calculadora de concentración de soluciones peptídicas
Introduce el contenido de tu vial y el volumen de diluyente para calcular la concentración de la solución y el volumen de transferencia necesario para una masa determinada en el ensayo. Solo para uso en investigación in vitro.
Introduce el contenido del vial, el volumen de diluyente y la masa objetivo del péptido para tu ensayo. La calculadora devuelve la concentración de la solución madre y el volumen de transferencia necesario.
Masa total de péptido en la etiqueta del vial
Diluyente total añadido al vial (mL)
Masa requerida para el ensayo (mcg)
2.50 mg/mL
2500 mcg/mL
100.0 µL
0.1000 mL
Cómo utilizar esta calculadora
- 1Introduce el contenido total de péptidos de tu vial en miligramos (mg). Es la cantidad impresa en la etiqueta del vial.
- 2Introduce el volumen total de diluyente (PBS estéril, tampón de ensayo, DMSO o ácido acético diluido, según corresponda a tu protocolo) añadido al vial en mililitros (mL). Esto determina la concentración de tu solución madre.
- 3Introduce la masa de péptido requerida para tu ensayo en microgramos (mcg).
- 4La calculadora indica la concentración de la solución madre resultante en mcg/mL y el volumen de transferencia en µL necesario para añadir esa masa a tu pocillo o tubo de ensayo.
- 5Cambia a la pestaña Inverso si ya conoces el volumen transferido y necesitas verificar la masa de péptido resultante.
Solo para uso en investigación
Esta herramienta se proporciona únicamente para la planificación de investigaciones de laboratorio in vitro. Todos los compuestos vendidos por Pure Peptides están estrictamente destinados al uso en investigación de laboratorio. Esta calculadora no constituye asesoramiento médico y no debe utilizarse para guiar la administración de ninguna sustancia en humanos o animales.
Volúmenes de diluyente habituales
Preguntas frecuentes sobre reconstitución
¿Qué diluyente debo usar para reconstituir un péptido liofilizado para uso in vitro?
El diluyente adecuado depende del compuesto y las condiciones del ensayo. Los sistemas de tampón acuoso, como PBS estéril (pH 7,4) o tampón de ensayo estándar, son adecuados para la mayoría de los péptidos. Los péptidos poco solubles en agua pueden requerir una disolución inicial en DMSO seguida de dilución en tampón acuoso; un punto de partida habitual es 10 mM en DMSO diluido hasta ≤0,1% de DMSO en el volumen final del ensayo. Algunos péptidos, especialmente los que contienen residuos de cisteína o tienen carácter básico, se disuelven mejor en ácido acético diluido (0,1–1%). Consulte el COA específico del compuesto y los protocolos de su institución para obtener orientación.
¿Cómo reconstituyo un vial de péptido liofilizado para uso en ensayos?
Utilizando una pipeta o micropipeta calibrada, transfiera el volumen apropiado del diluyente elegido al vial. Dirija el líquido por la pared interior del vial para minimizar el estrés mecánico sobre el liofilizado. Agite suavemente o gire el vial hasta que el polvo esté completamente disuelto; no agite en vórtice. La solución madre resultante debe ser transparente. Si persisten partículas o turbidez, deje reposar el vial 15–30 minutos antes de usar.
¿Cómo preparo concentraciones de trabajo a partir de una solución madre?
Una vez preparada la solución madre, utilice dilución seriada para alcanzar la concentración de trabajo requerida por su ensayo. Por ejemplo, una solución madre de 1 mg/mL (1000 mcg/mL) diluida 1:100 en tampón de ensayo da una solución de trabajo de 10 mcg/mL. Use la calculadora para determinar la concentración de la solución madre a partir del contenido del vial y el volumen de diluyente, y luego calcule el factor de dilución necesario para alcanzar la concentración objetivo del ensayo.
¿Cómo debo almacenar una solución madre de péptido reconstituida?
Prepare únicamente el volumen necesario para su ensayo inmediato siempre que sea posible. Si almacena una solución madre reconstituida, consérvela a 2–8 °C y úsela dentro del plazo especificado en el protocolo institucional para reactivos de investigación acuosos. Evite los ciclos repetidos de congelación-descongelación, que pueden provocar agregación y degradación del péptido. El polvo liofilizado restante en el vial debe almacenarse a -20 °C o por debajo.
¿Qué concentración debo establecer como objetivo para mi solución madre?
Establezca como objetivo una concentración de la solución madre que proporcione un volumen de transferencia práctico para su ensayo, idealmente entre 1 y 100 µL por pocillo o tubo. Los volúmenes de transferencia muy pequeños (inferiores a 1 µL) introducen errores de pipeteo; los volúmenes muy grandes son poco prácticos. Utilice la calculadora para probar distintos volúmenes de diluyente y encontrar una concentración de solución madre que sitúe las cantidades de ensayo requeridas en un rango de transferencia de 5–50 µL para un pipeteo preciso.
¿El volumen de diluyente modifica el contenido total de péptido del vial?
No. La masa total de péptido está fijada por el peso indicado en la etiqueta del vial, independientemente de la cantidad de diluyente añadida. Añadir más diluyente reduce la concentración; añadir menos la aumenta. La calculadora utiliza esta relación —concentración (mcg/mL) = masa total del vial en mcg dividida por el volumen de diluyente en mL— para calcular todos los demás valores.
¿Qué hago si mi péptido no se disuelve completamente?
Deje reposar el vial a temperatura ambiente durante 15–30 minutos después de añadir el diluyente y agite suavemente. Si la disolución sigue siendo incompleta, pruebe con un diluyente diferente: los péptidos con alto contenido hidrofóbico suelen requerir una disolución inicial en un pequeño volumen de DMSO (normalmente 10 mM) antes de la dilución acuosa; los péptidos con múltiples residuos básicos pueden disolverse mejor en ácido acético diluido (0,1–1%). No caliente la solución. Si los problemas persisten, consulte las notas de manejo del COA o contáctenos.
¿Necesitas un diluyente de laboratorio?
Disponemos de agua bacteriostática de grado investigación en viales de 10 mL, adecuada como diluyente para determinados péptidos liofilizados en protocolos de tampón acuoso.
Tienda Agua Bacteriostática